摘要:熒光分光光度計生物化學、生物醫學、環境化工已經得到普遍的運用,本文主要介紹了熒光分光光度計功能特點、熒光分光光度計分類和優缺點分析、其次介紹了熒光分光光度計產品應用及用途和它的原理,最后介紹了熒光分光度計使用的詳細步驟。
熒光分光光度計功能特點
1. 熒光發射光譜
選擇某一固定波長的光激發樣品,記錄樣品中產生的熒光發射強度與發射波長間的函數關系,即得熒光發射光譜。
2. 熒光激發光譜
選定某一熒光發射波長記錄熒光發射強度作為激發光波長的函數,即得熒光激發光譜。
3.時間分辨技術;
可用于對混合物中光譜重疊但有壽命差異的組分進行分辨并分別測量。
時間分辨熒光測定公式如下:
P(t) = P0 EXP (-t /τ)
式中P(t):擬合指數函數
P0:強度取值
EXP:指數運算符
t:時間取值
τ:熒光平均時間壽命
熒光分光光度計分類
熒光光譜法具有靈敏度高、選擇性強、用樣量少、方法簡便、工作曲線線形范圍寬等優點,可以廣泛應用于生命科學、醫學、藥學和藥理學、有機和無機化學等領域。
熒光分光光度計的發展經歷了手控式熒光分光光度計,自動記錄式熒光分光光度計,計算機控制式熒光分光光度計。
光分光光度計三個階段;熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計,配有壽命和相分辯測定的熒光分光光度計等。
熒光分光光度計優缺點
優點:
靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標記物所發出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環境下的構象變化, 從而闡明分子結構與功能之間的關系。
缺點:
1、熒光的光強并不高,所以呈線性情況有時不很理想;
2、某些反應熒光持續的時間較短;
3、熒光的發散方向不集中,不像透射光那樣集中,強度高;
4、受某些離子的干擾影響,熒光會湮滅,試驗速度必須要快。
熒光分光光度計主流產品
上海棱光生產的F96系列、F97系列熒光分光光度計、頂級F98熒光分光光度計;
天津港東生產的F-380型、F-320型、F-280型熒光分光光度計;
天津拓普生產的WFY-28型熒光分光光度計;
上海三科生產的970CRT型熒光分光光度計;
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